La electroforesis en gel de agarosa es un método de electroforesis que utiliza la agarosa como medio para separar ADN o ARN de diferentes tamaños. La agarosa es un polisacárido hidrófilo pero sin carga.
El ADN se carga negativamente en condiciones alcalinas (tampón pH 8,0), y bajo la acción de la corriente, utilizando gel de agarosa como medio, pasa del electrodo negativo al positivo según el tamaño. y la forma de diferentes fragmentos moleculares de ADN, la velocidad de natación en el campo eléctrico también es diferente. Al mismo tiempo, agregar tinte a la muestra puede formar un complejo con las moléculas de ADN, ¿se puede ver la posición? , para lograr el propósito de separación e identificación.
Precauciones para la electroforesis en gel de agarosa
La placa inferior debe sellarse herméticamente con cinta adhesiva, de lo contrario el gel se escapará durante el llenado. Al verter pegamento, primero puede verter una pequeña cantidad de gel en la unión y usar el gel solidificado para sellarlo herméticamente.
El peine no debe insertarse en la parte inferior, debe estar a una distancia de 1 a 2 mm de la parte inferior, de lo contrario, el gel se romperá fácilmente cuando se extraiga el peine, lo que provocará una fuga de pegamento al calentar. , tenga cuidado de no dejar que la agarosa hierva demasiado y no hierva ligeramente. Solo espere hasta que la solución se enfríe, es decir, que se disuelva por completo. Una ebullición excesiva provocará un aumento en la concentración real del gel.
Al colocar el gel en el tanque de electroforesis, preste atención a la polaridad y no invierta los polos positivo y negativo. Tenga cuidado de arrancar la cinta selladora en ambos extremos. La concentración del gel está relacionada con el tamaño del ADN a separar. La concentración general es 1. El pegamento con baja concentración es particularmente frágil, así que tenga cuidado.