A las 22:15 horas del 14 de abril de 1865, Lincoln fue asesinado en el Teatro Ford de Washington.
Booth entró tranquilamente en el palco presidencial a las 22:00 horas. Originalmente, la caja tenía cerradura, pero la cerradura se rompió hace unos días y nadie informó de ello. Dado que Booth era originalmente actor, ninguno de los guardias del presidente le causó ningún problema. Se suponía que el policía John Pike estaría vigilando la entrada desde el vestíbulo hasta el palco, pero no tenía interés en ver el espectáculo, por lo que se escondió en otra habitación para beber.
Cuando Booth entró en la caja, tranquilamente apuntó el arma entre la oreja izquierda de Lincoln y su espalda... *** disparó 8 veces, y Lincoln recibió 6 impactos, 5 de los cuales dieron en el blanco. Sin embargo, entre los 1.675 espectadores, sólo unos pocos escucharon los disparos. Incluso la señora Lincoln y varias personas que acompañaban al teatro no se sorprendieron demasiado por los disparos. Debido a que Booth eligió filmar en el clímax de la obra, fue difícil escuchar la risa de los actores mezclada con el sonido de los disparos.