Mickey, el personaje principal de Mickey Mouse Clubhouse, anima a sus amigos y espectadores a seguir buscando respuestas a las preguntas de la vida. A pesar de sus diversas personalidades, Mickey es un buen amigo para todos. Su carisma y amabilidad lo convirtieron en la figura central de la Casa de las Maravillas, y su intimidad y riqueza de emociones lo convirtieron en el personaje de dibujos animados más popular de la historia.
Plutón es el perro mascota más leal de Mickey Mouse. Sin embargo, cuando apareció por primera vez, era un perro de caza llevado por la policía para cazar al fugitivo Mickey Mouse. No tenía nombre. Plutón es un perro puro que sólo puede expresar su amor y odio a través de sonidos nasales.
Minnie es la novia de Mickey Mouse. Es una ratona de aspecto dulce con un enorme lazo en la cabeza, muy linda.
Goofy (que significa estúpido) es un perro de buen corazón pero no muy flexible. Aparece como contraste con Plutón. La cacofonía de risas que emitió durante su debut lo distinguió de la multitud.
El Pato Donald es irritable, impaciente, en ocasiones especialmente belicoso y tiene una voz ronca. El Pato Donald es conocido por ser pendenciero con los demás. A pesar de su temperamento cascarrabias y su tendencia a pelear, el Pato Donald siempre ha tenido un círculo de amigos cercanos a su lado, sin mencionar a sus fieles seguidores que se apresuran a ver sus arrebatos y sus ingeniosas travesuras.
Daisy, un simpático patito. Un poco tacaña, pero muy amable; le gusta luchar contra la injusticia y le gustan más los moños, a menudo los usa en la cabeza (principalmente morados, pero también rosados y ocasionalmente azules). Está enamorada del pato Donald (en realidad). ella es la hija del Pato Donald) amiga). Tiene muy buena relación con Minnie y odia a la gente mala. Suena un poco raro, pero es muy dulce.