Larry (interpretado por Ben Stiller)
En el primer episodio, Ben Stiller interpreta a un nuevo guardia nocturno en el Museo de Historia Natural. Después de trabajar, se descubren una serie de cosas extrañas. La noche en el museo fue caótica. Cada exposición cobró vida y lo amenazó... Tuvo que luchar para sobrevivir dentro. En "Noche en el Museo 2", Larry se encuentra con una situación completamente nueva. Esta vez ya era un inventor exitoso, con fama y fortuna, pero siempre sintió una sensación de pérdida, como si le faltara algo importante en su vida. Pero pronto recibió un mensaje del Smithsonian, que una vez más trajo confusión a su vida. La profundidad de la amistad que había establecido antes también le recordó esos días salvajes y emocionantes. Amelia Earhart (interpretada por Amy Adams)
Pocas mujeres pueden encarnar el espíritu de aventura como Amelia Earhart. Una pionera que cambió el modo de vuelo del pasado con su estilo personal de vuelo en solitario e influyó en varias generaciones de mujeres. el futuro. Amelia Earhart era conocida por su inteligencia, ingenio, independencia y atrevidas habilidades de vuelo. Cuando Amelia Earhart se convirtió con éxito en la primera mujer piloto en cruzar el Océano Atlántico, algunas personas la apodaron "Sra. Lindy" debido a su carrera récord y su apariencia. Era similar a otra pionera y heroína estadounidense, Lindbergh. , en ese momento su popularidad y popularidad alcanzaron su punto más alto, pero desapareció del Océano Pacífico en 1937, pero esto no dañó la admiración y el amor por ella en todo el mundo... Y esto también lo tiene en el estatus del Smithsonian. Amelia Earhart significó más para Larry porque hizo que su corazón latiera con fuerza en esa noche especial en el Smithsonian. Kahmunrah (Hank Azaria)
Un antiguo villano que no quiere nada más que gobernar el mundo. Después de que se le negó el trono, no podría estar más feliz de tener otra oportunidad de convertirse en Rey del Mundo. Utilizará los métodos más crueles para vengar todas las injusticias que el mundo le ha cometido en los últimos días. Es arrogante y malvado, y siempre habla con muchas palabras. Iván el Terrible (Christopher Guest)
Es un tipo muy desagradable. Un ruso con una enfermedad mental que siempre le grita a la gente. Junto con Capone y Napoleón, sirvió al faraón Kahmunrah.